Ini adalah jenis mikroskop optik medan terang khusus yang memiliki banyak kesamaan dengan mikroskop fase kontras. Untuk membuat mikroskop medan gelap, letakkan diafragma medan gelap di bawahnya dan buat kerucut cahaya berongga di bawah kondensor yang masuk ke objektif hanya dari sampel.
Teknik ini digunakan untuk memvisualisasikan sel hidup yang tidak ternoda. Hal ini dilakukan dengan menyinari sampel karena ketika sinar kerucut berongga diteruskan ke sampel, sinar yang dibelokkan (tidak dipantulkan/tidak dibiaskan) tidak melewati lensa objektif, sedangkan sinar yang tidak dibiaskan (dipantulkan/dibiaskan) akan melewati lensa objektif. Cahaya melewati lensa objektif ke spesimen, membentuk gambar.
Hal ini menyebabkan area sekitar sampel tampak hitam dan sampel tampak terang. Hal ini dimungkinkan oleh latar belakang gelap (yaitu mikroskop lapangan gelap).
Penerapan Mikroskop Darkfield
Ini digunakan untuk memvisualisasikan organ dalam sel yang lebih besar seperti sel eukariotik
Identifikasi sel bakteri dengan bentuk unik, seperti Treponema pallidum (Treponema pallidum).
