Ini adalah omikroskop ptikdi mana penyimpangan cahaya kecil, atau pergeseran fasa, terjadi selama penetrasi cahaya ke dalam sampel yang tidak diwarnai. Pergeseran fase ini diterjemahkan ke dalam gambar, artinya ketika cahaya melewati sampel buram, pergeseran fase mencerahkan sampel, menciptakan gambar yang menyala (terang) di latar belakang.
Mikroskop kontras fase menghasilkan gambar dengan kontras tinggi ketika bekerja dengan spesimen transparan, sehingga hal ini terutama berlaku untuk gambar kultur mikroba, fragmen jaringan tipis, jaringan seluler, dan partikel subseluler.
Prinsip dibalik pengoperasian mikroskop kontras fasa adalah dengan menggunakan metode optik untuk mengubah spesimen menjadi gambar amplitudo, yang dilihat melalui lensa okuler mikroskop.
PCM dapat digunakan untuk melihat sel yang tidak diwarnai (juga dikenal sebagai objek fase), yang berarti morfologi sel tetap terjaga dan sel dapat diamati dalam keadaan alaminya, dengan kontras tinggi dan kejelasan yang efektif. Hal ini karena jika spesimen diwarnai dan difiksasi, maka akan membunuh sebagian besar sel, suatu ciri yang tidak dapat dihilangkan dengan mikroskop cahaya medan terang.
Pergeseran yang terjadi selama penetrasi cahaya diubah menjadi perubahan amplitudo sehingga menimbulkan kontras gambar.
Dikombinasikan dengan elemen peningkat kontras (seperti fluoresensi), elemen ini memungkinkan presentasi gambar spesimen lebih baik.
Bagian dari mikroskop kontras fase
Instrumentasi mikroskop kontras fase didasarkan pada jalur cahaya dari penerimaan sumber cahaya hingga visualisasi gambar.
Oleh karena itu, rangkaiannya terdiri dari:
Sumber cahaya (lampu busur merkuri)
tembakan kelompok
bukaan
kondensator
Kondensor cincin
contoh
Tujuan
pelat foto
cahaya terpolarisasi
cincin fase
Fitur mikroskop kontras fase
Perubahan yang disebabkan oleh cahaya yang dibelokkan (dibelokkan) dan cahaya yang tidak dibelokkan yang mencapai sampel tempat diserapnya dihasilkan pada panjang gelombang tertentu dan menimbulkan warna. Perbedaan yang disebabkan oleh cahaya yang dihamburkan dan cahaya yang diserap disebut perubahan amplitudo. Perubahan amplitudo ini sensitif dan oleh karena itu tidak dapat divisualisasikan oleh peralatan fotografi seperti mikroskop kontras fase dan oleh karena itu dapat dilihat oleh mata manusia.
Kondensor mikroskop kontras fasa memiliki piringan buram yang disebut cincin, sedangkan cincin transparan menghasilkan kerucut cahaya yang melewati sampel. Saat cahaya berubah, sebagian cahaya pada sampel dibelokkan karena perubahan kepadatan optik, sehingga membentuk gambar pada lensa objektif. Cahaya yang tidak dibelokkan akan mengenai cincin fasa pada pelat fasa, sedangkan cahaya yang dibelokkan akan mengenai cincin fasa yang langsung melewati pelat fasa sehingga membentuk suatu gambar.
Mikroskop kontras fase dirancang dengan tujuan yang dapat melakukan berbagai fungsi bila digunakan bersama dengan teknik peningkatan kontras seperti fluoresensi. Sasarannya terletak di pelat fase internal, yang mengubah penyerapan cahaya dan pergeseran fase (yaitu, tidak terdifraksi), menciptakan spektrum luas untuk membedakan sampel dan menciptakan kontras yang kuat di latar belakang.
Penerapan mikroskop fase kontras
Menentukan morfologi sel hidup, seperti sel hewan dan tumbuhan
Mempelajari motilitas dan struktur pergerakan mikroorganisme
Deteksi elemen mikroba tertentu seperti endospora bakteri
